生物技術(shù)中細(xì)胞培養(yǎng)是核心工藝行動力,高水平的細(xì)胞培養(yǎng)依賴于高質(zhì)量的培養(yǎng)基預期。在培養(yǎng)基的主要成份中,動(dòng)物血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖發(fā)揮著重要作用。血清不僅富含多種蛋白、生長(zhǎng)因子等細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成分新技術,同時(shí)可提供貼壁因子強大的功能、蛋白酶抑制劑等保護(hù)細(xì)胞不受傷害組合運用。
在動(dòng)物血清中牛血清的應(yīng)用最為廣泛結論,所以保證牛血清的質(zhì)量也是促進(jìn)生物制品質(zhì)量提高的重要環(huán)節(jié)和諧共生。一般體外細(xì)胞培養(yǎng)的牛血清多采用胎牛血清、新生牛血清適應性強、小牛血清技術交流。
不同牛血清的來(lái)源:胎牛血清源自健康母牛體內(nèi)的胎牛,是通過(guò)胎牛心臟穿刺采血獲取的血清相對較高;新生牛血清從出生2周內(nèi)的新生牛靜脈取血獲取資源配置。小牛血清采自出生2周到1年內(nèi)的小牛靜脈取血;
牛血清成品的獲取
• 胎牛相關、新生牛大力發展、小牛的血液采集及儲(chǔ)存
• 原血全程冷鏈運(yùn)輸
• 原血冷凍離心,收集血清生產效率、凍存
• 血清使用前解凍產能提升、過(guò)濾
• 成品質(zhì)量檢測(cè)
血清使用前解凍
① 將血清從冷凍室移至2~8℃冰箱解凍節點,再放置室溫進(jìn)行徹底解凍通過活化,這樣可以避免溫度變化太大,造成蛋白析出的特點;
〗】蛋l展、?解凍時(shí)需不斷均勻搖晃,這樣操作可以使血清的溫度和成分均一大數據,以減少絮狀沉淀物的生成長效機製;
③ 嚴(yán)禁將血清在37℃長(zhǎng)時(shí)間孵育解凍高效化,否則血清可能會(huì)產(chǎn)生沉淀&許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)受到破壞而影響血清品質(zhì)製高點項目。
血清使用前過(guò)濾工藝
步驟1:粗血清大多數(shù)前處理會(huì)使用線繞濾芯或膜堆過(guò)濾去除粘性物質(zhì);根據(jù)客戶工藝的不同範圍和領域,也會(huì)使用到濾袋、玻纖進(jìn)行過(guò)濾各項要求。
PP折疊濾芯
PES/PVDF膜濾芯
步驟2:一步0.45-1μm或2-3μm+0.45-1μm兩步預(yù)過(guò)濾更高要求,其作用是去除雜質(zhì)的同時(shí)保護(hù)后端膜過(guò)濾,比較常用的膜材質(zhì)是親水性PES或PVDF新技術;
步驟3:0.22μm和0.1μm的除菌共同學習、除支原體過(guò)濾,確保成品無(wú)細(xì)菌深入、無(wú)支原體效高。
過(guò)濾工藝其他注意點(diǎn)有哪些?
1. 血清過(guò)濾開(kāi)始時(shí),濾速可以控制相對(duì)小一些性能,后逐步升至正常濾速拓展基地,這樣可以延長(zhǎng)濾芯的使用壽命;
2. 一般血清過(guò)濾前和過(guò)濾完成后實力增強,需對(duì)0.22μm/0.1μm過(guò)濾產(chǎn)品進(jìn)行完整性檢測(cè)體系流動性。